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人上皮細(xì)胞粘附分子 Ep-CAM/ELISA試劑盒

簡要描述:人上皮細(xì)胞粘附分子 Ep-CAM/ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
用途:用于科研實(shí)驗(yàn)。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存: 2-8℃。
2.有效期: 6個(gè)月
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如

  • 產(chǎn)品型號(hào):SLB10043
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-07-25
  • 訪  問  量:480
詳情介紹
品牌其他品牌純度HPLC≥98%
貨號(hào)mlkx10043規(guī)格48T 96T
供貨周期現(xiàn)貨主要用途科研實(shí)驗(yàn)
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)檢測抗體OD450
酶聯(lián)科興生物人上皮細(xì)胞粘附分子 Ep-CAM/ELISA試劑盒
用途
該試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中濃度。
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的抗原會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素??贵w與結(jié)合在包被抗體上的抗原結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,抗原濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中指標(biāo)的濃度。
樣品活化方法
生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標(biāo)活性前必須進(jìn)行活化處理。
活化方法如下:
血清、血漿: 280 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了10倍!
細(xì)胞培養(yǎng)上清:20 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入100 μL樣品,混勻,加入40 μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40 μL活化試劑2,混勻后立即檢測。
注意:樣品被稀釋了2倍!
組織勻漿:1960 μL標(biāo)準(zhǔn)品&樣品稀釋液中加入40 μL樣品,混勻后檢測。
注意:樣品被稀釋了50倍!活化方法如下:

操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。
4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
9. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人上皮細(xì)胞粘附分子 Ep-CAM/ELISA試劑盒
試驗(yàn)所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙

操作注意事項(xiàng)

1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。































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